关键词:Micro-CT;LathetaLCT-;小动物CT应用;肺气肿
背景:COPD病人的临床表现为肺气肿和慢性气道阻塞,并且病情随着细菌和病毒感染而进一步恶化。然而,对该病发病机理认知有限。本文通过比较PBS处理组、elastase处理组、LPS处理组和elastase+LPS处理组小鼠,并通过Micro-CT来测量低密度区面积(LAA%),来监测和评估小鼠动物肺气肿病变进程。
方法:选取雄性C57BL/6J作为实验对象,在10-14周龄注射4.2UPPE(PorcinePancreaticElastase)诱导肺气肿。21天后经鼻注射LPS(1mg/kg)。
Micro-CT型号:LathetaLCT-;
扫描空间分辨率:48μm×48μm;
扫描断层厚度:μm;
3D图像重建软件:VGStudioMAX2.1;
结果:
1.Elastase+LPS小鼠肺部炎症加重
为了建立处于后期的COPD动物模型,评估了不同造模方法的作用。
Fig.1.建立实验动物模型的流程图
2.Elastase+LPS处理组小鼠的BAL液体中CD8+T细胞量显著增加
Fig.3.Elastase+LPS处理组小鼠的BAL液体中CD3+和CD8+T细胞含量
A:BAL液体中theratioofCD4+TcellstoCD3+Tcells
B:BAL液体中theratioofCD8+TcellstoCD3+Tcells
C:50ulBAL样品中perforin含量的WB分析
D:Therelativeperforinimmunoreactivitybythebandintensity
3.Elastase+LPS处理组小鼠的BAL悬浮液中MMP-9和TIMP-1含量增加
在COPD病程的发展过程中,MMP-9和TIMP-1含量之间的平衡是一项重要的指标。
Fig.4Elastase+LPS处理组小鼠的BAL悬浮液中MMP-9和TIMP-1含量明显增加
A、B:4组小鼠在LPS处理三天后的BAL液体中MMP-9含量
C:4组小鼠在LPS处理三天后的BAL液体中TIMP-1含量
4.Elastase+LPS处理组小鼠肺气肿病程的Micro-CT长时间连续检测
Elastase+LPS处理组小鼠的病理切片显示出肺气肿病变的发展。
Fig.5Elastase+LPS处理组小鼠的肺气肿病程
A:4组小鼠的Micro-CT扫描法分析结果
B:4组小鼠肺部HE染色切片
C:4组小鼠肺气肿Lms指标分析
Fig.6小鼠肺气肿模型的3D重建图像
A:肺气肿模型小鼠的Micro-CT3D重建图像
Note:黄色代表LAA(-to-HU)的区域,透明部分代表肺部整体(-t0-HU)
B:肺气肿小鼠肺部2D切片
Note:蓝色代表LAA(-to-HU)的区域,透明部分代表肺部整体(-t0-HU)
结论:采用Micro-CT扫描小鼠肺气肿病变,其分析参数LAA%可以很好的反映出肺气肿病变的程度,同时,发现LAA%与Lm之间存在密切的相关性。
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